猴痘病毒（Monkeypox virus）
抗體參數(shù)
| 名稱 | 猴痘病毒抗體（Monkeypox virus antibody） | |||||||||
| 貨號(hào) | R386t7 | R387c6 | R392a3 | R396t5 | R395a6 | R399e2 | R401c8 | R400e7 | R417t6 | R418t3 |
| 免疫原 | 重組MPXV A35R抗原 | 重組MPXV A29L抗原 | 重組MPXV B6R抗原 | 重組MPXV M1R抗原 | ||||||
| 類別 | 全人源單抗 | |||||||||
| 反應(yīng)物種 | 猴痘病毒 | |||||||||
| 應(yīng)用平臺(tái) 推薦配對(duì) |
免疫層析 | |||||||||
| R386t7（捕獲）-R392a3（檢測(cè)） R387c6（捕獲）-R392a3（檢測(cè)） |
R396t5（捕獲）-R399e2（檢測(cè)） R396t5（捕獲）-R395a6（檢測(cè)） |
R401c8（捕獲） -R400e7（檢測(cè)） |
R417t6（捕獲） -R418t3（檢測(cè)） |
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| 純度 | Protein A/G純化，純度>95% | |||||||||
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 | |||||||||
| 儲(chǔ)存 | -20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融 | |||||||||
抗原參數(shù)
| 名稱 | 猴痘病毒抗原（Monkeypox virus antigen） | |||||||
| 貨號(hào) | C1618 | C1619 | C1620 | C1621 | C1622 | C1624 | C1625 | |
| 基因名 | A29L | A35R | B6R | M1R | ||||
| 種屬 | 猴痘病毒 | |||||||
| 類型 | 重組 | |||||||
| 標(biāo)簽 | His | |||||||
| 表達(dá)系統(tǒng) | 真核 | 原核 | 真核 | 原核 | 真核 | 真核 | 原核 | |
| Uniprot ID | Q9YN60 | Q80KX2 | Q773E2 | Q80KX3 | ||||
| 預(yù)測(cè)分子量 | 13.3kDa（含標(biāo)簽） | 14.3kDa（含標(biāo)簽） | 31.6kDa（含標(biāo)簽） | 20.4kDa（含標(biāo)簽） | ||||
| SDS-PAGE | A29L、A35R、B6R、M1R的預(yù)測(cè)分子量分別為13.3kDa、14.3kDa、31.6kDa、20.4kDa |
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| 純度 | >90%，評(píng)估來源于R250染色的SDS-PAGE膠 | |||||||
| 緩沖液 | 1x PBS，pH 7.4 | |||||||
| 儲(chǔ)存 | -80℃分裝保存，避免反復(fù)凍融 | |||||||
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
A35R抗體生物活性驗(yàn)證
在ELISA平臺(tái)上利用猴痘病毒A35R抗原C1620、C1621分別檢測(cè)MPXV A35R單克隆抗體R383e5、R387c6、R386t7、R384c2、R392a3。其中R383e5、R387c6的EC50分別為7.29 ng/mL、9.86 ng/mL。
圖1. A35R抗體（R383e5）ELISA檢測(cè)結(jié)果
圖2. A35R抗體（R387c6）ELISA檢測(cè)結(jié)果
A29L抗體生物活性驗(yàn)證
在ELISA平臺(tái)上利用猴痘病毒A29L抗原C1619檢測(cè)MPXV A29L單克隆抗體R395a6，EC50為10.54ng/mL。
圖3. A29L抗體（R395a6）ELISA檢測(cè)結(jié)果
B6R抗體生物活性驗(yàn)證
在ELISA平臺(tái)上利用猴痘病毒B6R抗原C1622分別檢測(cè)MPXV B6R單克隆抗體R401c8，EC50為15.26ng/mL。
圖4. B6R抗體（R401c8）ELISA檢測(cè)結(jié)果
A35R抗體膠體金應(yīng)用平臺(tái)驗(yàn)證
利用猴痘病毒A35R抗體制備膠體金試紙條，分別包被A35R抗體R386t7、R387c6、R384c2，標(biāo)記A35R抗體R392a3，對(duì)0、0.01、0.1、1、10及100 ng/mL濃度的?A35R抗原C1620進(jìn)行檢測(cè)，T線顏色呈明顯梯度變化，3對(duì)抗體檢測(cè)靈敏度均可達(dá)10 pg/mL。
圖5. 猴痘病毒A35R抗體膠體金檢測(cè)結(jié)果
A29L抗體膠體金應(yīng)用平臺(tái)驗(yàn)證
利用猴痘病毒A29L抗體制備膠體金試紙條，分別包被A29L抗體R396t5，標(biāo)記A29L抗體R399e2，對(duì)0、0.01、0.1、1、10及100 ng/mL濃度的?A29L抗原C1619進(jìn)行檢測(cè)，T線顏色呈明顯梯度變化，抗體檢測(cè)靈敏度可達(dá)10 pg/mL。
圖6. 猴痘病毒A29L抗體膠體金檢測(cè)結(jié)果
B6R抗體膠體金應(yīng)用平臺(tái)驗(yàn)證
利用猴痘病毒B6R抗體制備膠體金試紙條，分別包被B6R抗體R401c8，標(biāo)記B6R抗體R400e7，對(duì)0、0.01、0.1、1、10及100 ng/mL濃度的?B6R抗原C1622進(jìn)行檢測(cè)，T線顏色呈明顯梯度變化，抗體對(duì)檢測(cè)靈敏度均可達(dá)50 pg/mL。
圖7. 猴痘病毒B6R抗體膠體金檢測(cè)結(jié)果
M1R抗體膠體金應(yīng)用平臺(tái)驗(yàn)證
利用猴痘病毒M1R抗體制備膠體金試紙條，分別包被M1R抗體R417t6，標(biāo)記M1R抗體R418t3，對(duì)0、0.0125、0.05、0.1、1ng/mL濃度的M1R抗原C1624進(jìn)行檢測(cè)，T線顏色呈明顯梯度變化，抗體對(duì)檢測(cè)靈敏度均可達(dá)10pg/mL。
圖8. 猴痘病毒M1R抗體膠體金檢測(cè)結(jié)果
試用申請(qǐng)
項(xiàng)目介紹
猴痘病毒（Monkeypox virus, MPXV）是一種有包膜的雙鏈DNA病毒，屬于正痘病毒屬（Orthopoxvirus genus）。MPXV大小為200×250 nm，呈卵形或磚狀，核心區(qū)外包被脂蛋白雙層膜，膜表面布滿隨機(jī)排列的管狀元件（STE）。MPXV能有效地感染人原代單核細(xì)胞。與牛痘病毒（CPV）不同，MPXV并非通過干擾MHC的表達(dá)或胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，影響免疫應(yīng)答；而是通過抑制CD4+和CD8+ T細(xì)胞活化，消除局部T細(xì)胞反應(yīng)，避免全身免疫抑制及免疫監(jiān)測(cè)。
猴痘病毒基因組是一個(gè)線性雙鏈DNA分子（約為197 kb），末端包含一個(gè)由單鏈發(fā)夾環(huán)共價(jià)連接的反向重復(fù)序列（ITR），ITR包含一組短的串聯(lián)重復(fù)序列和多個(gè)ORF。MPXV基因組編碼管家功能的基因位于高度保守的中心區(qū)域，編碼毒力、宿主范圍的基因位于末端可變區(qū)域。MPXV對(duì)宿主細(xì)胞的DNA和RNA復(fù)制的依賴程度很低，可能與同屬病毒相似，在宿主細(xì)胞質(zhì)中復(fù)制形態(tài)獨(dú)特的胞內(nèi)成熟病毒（IMV）和胞外包膜病毒（EEV）。IMV具有堅(jiān)固的物理結(jié)構(gòu)，便于在宿主之間傳播，而更脆弱的EEV被包膜包裹，限制宿主免疫清除，因此適合病毒在細(xì)胞間傳播。
參考文獻(xiàn)
[1] Sarah Keasey, Christine Pugh, Alexander Tikhonov, et al. Proteomic Basis of the Antibody Response to Monkeypox Virus Infection Examined in Cynomolgus Macaques and a Comparison to Human Smallpox Vaccination[J].Plos one,2010,5(12): e15547.
[2] Emmanuel Alakunle, Ugo Moens, Godwin Nchind, et al.Monkeypox Virus in Nigeria: Infection Biology, Epidemiology, and Evolution[J].Viruses, 2020, 12(11):1257.
[3] S. N. Shchelkunov, A. V. Totmenin, P. F. Safronov, et al. Analysis of the Monkeypox Virus Genome[J].Virology, 2002, 297: 172-194.
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