維生素B12（VB12）

抗體參數(shù)

名稱	維生素B12抗體（VB12 antibody）
貨號	H835e1
類型	單克隆抗體
宿主	兔
反應(yīng)物種	人
應(yīng)用平臺推薦配對	化學(xué)發(fā)光（AE）	化學(xué)發(fā)光（ALP）	免疫層析
	C1770（捕獲）-H835e1（檢測）	H835e1（捕獲）-C1716（檢測）	H835e1（捕獲）-C1750（檢測）
純度	Protein A/G純化，純度>95%
緩沖液	1xPBS，pH 7.4
儲存	-20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融

抗原參數(shù)

名稱	內(nèi)因子（IF）
貨號	C1716	C1750	C1770
種屬	豬
類型	重組
標簽	His
表達系統(tǒng)	真核
SDS-PAGE
純度	>90%，評估來源于R250染色的SDS-PAGE膠
緩沖液	1xPBS，pH 7.4
儲存	-80℃分裝保存，避免反復(fù)凍融

發(fā)光大包裝試劑

名稱	貨號	推薦平臺	方法學(xué)
維生素B12（VB12）發(fā)光大包裝試劑	Q801a1	化學(xué)發(fā)光（AE）	夾心法
維生素B12（VB12）發(fā)光大包裝試劑	Q801a2	化學(xué)發(fā)光（ALP）	夾心法

南京歐凱生物推出全新Vitamin B12夾心檢測產(chǎn)品，該系列發(fā)光大包裝試劑突破性整合傳統(tǒng)5組分，首次采用3組分體系。Okaybio技術(shù)團隊通過優(yōu)化反應(yīng)時序，檢測流程較傳統(tǒng)方案縮短30%，有效提升檢測效率。經(jīng)驗證該系列夾心檢測原料在化學(xué)發(fā)光平臺的檢測靈敏度可達5pg/mL，與羅氏樣本符合率>0.95。

VB12
VB12

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

化學(xué)發(fā)光平臺（AE）

1.校準曲線

用VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）檢測濃度范圍為0~2000pg/mL的VB12小分子純品。

圖1.VB12校準曲線

編號	濃度（pg/mL）	RLU
1	0.0	8308
2	22.2	64128
3	52.3	109666
4	499.5	957793
5	1004.1	2084186
6	2015.4	4067850

表1.VB12校準曲線數(shù)據(jù)

2.樣本符合率

用VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）檢測48例羅氏賦值樣本（濃度范圍35.1~1934pg/mL），信號梯度明顯，樣本符合率（R²）為0.9926。

圖2. VB12樣本符合率（羅氏賦值）

編號	樣本濃度（pg/mL）	檢測濃度（pg/mL）
1	35.1	43.8
2	36.2	32.4
3	54.3	59.8
?	?	?
47	1872	1931
48	1934	1889

表2. VB12樣本符合率數(shù)據(jù)（羅氏賦值）

3.最低檢測限

校準品	濃度（pg/mL）	RLU平均值	線性方程
S1	0	8308	y=2514.4x+8308
S2	22.2	64128
20次零濃度檢測RLU均值		8701
SD		427.7
平均值+2SD		9556
最低檢測限（pg/mL）		0.496

表3. VB12最低檢測限

4.特異性

用10mM PBS稀釋VB12、腺苷鈷胺（AdoCbl）、羥鈷胺（HOCbl）、甲鈷胺（MeCbl）抗原至500、2000pg/mL后上樣檢測。

圖3. VB12抗體識別特異性

理論濃度（pg/mL）	檢測濃度（pg/mL）
理論濃度（pg/mL）	VB12	AdoCbl	HOCbl	MeCbl
0	0	0	0	0
500	499	487	705	656
2000	2015	1615	1943	2224

表4. VB12抗體識別特異性數(shù)據(jù)

5.重復(fù)性

利用同一批VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）對濃度為50.26pg/mL和523.7pg/mL的羅氏賦值樣本各重復(fù)檢測10次，其測量濃度變異系數(shù)（CV）均小于3%。

低值樣本
測定值編號	RLU	濃度（pg/mL）
1	107100	50.26
2	107866	50.87
3	107502	50.58
4	107213	50.35
5	107112	50.27
6	108017	50.99
7	106987	50.17
8	106547	49.82
9	104710	48.36
10	108306	51.22
平均值	107136	50.29
標準差	/	0.80
CV	1.6%

表5. VB12檢測重復(fù)性（低值）

高值樣本
測定值編號	RLU	濃度（pg/mL）
1	991892	514.2
2	1010307	522.4
3	1003793	519.5
4	1037952	534.7
5	1009633	522.1
6	1074624	551.0
7	1041325	536.2
8	986505	511.8
9	1026037	529.4
10	1033005	532.5
平均值	1021507	527.4
標準差	/	11.79
CV	2.2%

表6.VB12檢測重復(fù)性（高值）

試用申請

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項目介紹

巨幼細胞性貧血屬于營養(yǎng)性貧血，《營養(yǎng)性貧血臨床路徑（2016年縣級醫(yī)院版）》及《巨幼細胞性貧血臨床路徑（2016年）》均指出巨幼細胞性貧血實驗室檢查的評定指標為血清葉酸測定（放射免疫法）＜6.91nmol/L（<3ng/mL）；和/或血清維生素B12（放射免疫法）＜74~103pmol/L（100~140ng/mL）；如果是大細胞性貧血，MCV＞100fl，多數(shù)紅細胞呈大卵圓形，網(wǎng)織紅細胞常減低。血清葉酸、維生素B12水平為住院患者的必查項目；在營養(yǎng)缺乏病因未根治時，仍需持續(xù)監(jiān)測血常規(guī)、血清鐵、葉酸及維生素B12水平。治療巨幼細胞性貧血時需注意，對于單純維生素B12缺乏的患者，如果單用葉酸治療會加重維生素B12的缺乏，特別要警惕會有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的發(fā)生或加重。

依據(jù)行業(yè)標準YY∕T 1677-2019，維生素B12測定試劑盒（標記免疫分析法）檢出限應(yīng)≤145pg/mL；線性區(qū)間不窄于[150，1000]pg/mL，在線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.990。對濃度≤250pg/mL和[400，700]pg/mL樣本重復(fù)測定時CV≤10%，批間CV≤15%。以上標準不適用于膠體金或其他方法標記的定性或半定量VB12檢測試劑。